RU
Получение ферментного препарата «Цитохром С» из нетрадиционного вида сырья

Номер: 4 (340), 2014
Страницы: 58-61
Раздел: Технология
Автор(ы): М.Д. Мукатова, А.В. Привезенцев , Н.А. Киричко, С.А. Сколков

Аннотация:
Цитохром С – важнейший фермент, входящий в любую живую клетку и отвечающий за перенос кислорода. Ткань сердечной мышцы морского млекопитающего каспийского тюленя отличается высоким содержанием цитохрома С. Объекты исследования: мороженые образцы сердца каспийского тюленя, ферментный препарат «Цитохром С» до и после очистки методом гель-фильтрации, сухой ферментный препарат «Цитохром С». Апробирован способ выделения цитохрома С из сердца каспийского тюленя посредством предварительного измельчения сырья, экстракции его в кислой среде при рН не менее 4,5 и температуре не выше 10°С, нейтрализации смеси до рН 7,0 раствором гидроокиси натрия, последующего ее центрифугирования при частоте вращения 3000–4000 об/мин, высаливания центрифугата сухим сульфатом аммония, повторного центрифугирования и очистки методом гель-фильтрации при пропускании центрифугата через колоноки, заполненные сефадексом марки G-25 в присутствии 0,9%-го хлорида натрия, с последующей сушкой солевого раствора ферментного препарата. Содержание чистого цитохрома С в солевом растворе ферментного препарата составило 234 мг/л, в сухом ферментном препарате, который может быть использован в качестве полуфабриката в фармацевтической промышленности, – 76,5–76,7%.

Ключевые слова: ферментный препарат, цитохром С, сердце каспийского тюленя, сефадекс, гель-фильтрация

EN
Obtaining of enzyme preparation “Cytochrome C” from nontraditional of raw materials

Number: 4 (340), 2014
Pages: 58-61
Section: Technology
Authors(s): М.D. Mukatova, A.V. Privezentsev , N.A. Kirichko, S.A. Skolkov

Annotation:
Cytochrome C is the most important enzyme that is included in any living cell and is responsible for oxygen transport. The tissue of the heart muscle marine mammal Caspian seal differs a high content of cytochrome C. Objects of research: the frozen heart of the Caspian seals, enzyme preparation “Cytochrome C” before and after purification by the method of gel filtration, dry enzyme preparation. Tested method for allocating heart cytochrome C from the Caspian seal by pre-grinding of raw materials, its extraction in an acid medium at a pH not less than 4,5 and a temperature not higher than 10°C, the mixture neutralized to pH 7,0 with sodium hydroxide, its subsequent centrifugation at speeds of 3000–4000 rev/min, centrifuged dry salting ammonium sulfate re-centrifugation and purified by gel filtration by passing through a series centrifuged columns filled with Sephadex G-25 brand in the presence of 0,9% sodium chloride solution, followed by drying with brine enzyme preparation. The content of pure cytochrome C in saline enzyme preparation was 234 mg/l, dry enzyme preparation – 76,5–76,7%, which can be used as an intermediate in the pharmaceutical industry.

Keywords: enzyme preparation, cytochrome C, heart of the Caspian seals, sephadex, gel filtration